الكشف عن الحمض النووي لفيروس كورونا المستجد

يتميز الكشف عن الحمض النووي بخصائص التشخيص المبكر ، والحساسية العالية والنوعية ، وهو "المعيار الذهبي" لتشخيص الالتهاب الرئوي التاجي الجديد.حاليا ، الأكثر استخداما على نطاق واسع في الوقت الحقيقي تكنولوجيا RT-PCR الكمي الفلوري.بشكل عام ، يتم الكشف عن الهدفين الموجودين على جينات ORF1ab و N للفيروس.يجب أن تفي نفس العينة بالهدف المزدوج الموجب أو الاختبار المتكرر كهدف فردي إيجابي ، أو يجب أن تفي العينتان بالهدف الفردي في نفس الوقت لتأكيد إيجابية الحمض النووي لفيروس SARS-CoV-2.

1. مبدأ مجموعة الكشف عن الحمض النووي؟يتم استخدام التسلسل الجيني الفريد للفيروس كهدف للكشف.من خلال تضخيم PCR ، يزداد تسلسل الحمض النووي المستهدف الذي نختاره أضعافا مضاعفة.يمكن دمج كل تسلسل DNA مضخم مع مسبار ذي علامة الفلورسنت أضفناه مسبقًا.تنتج إشارة الفلورسنت ، وكلما زاد تضخيم الجينات المستهدفة ، زادت قوة إشارة الفلورسنت المتراكمة.في العينات الخالية من الفيروس ، نظرًا لعدم وجود تضخيم جيني مستهدف ، لا يمكن اكتشاف زيادة في إشارة التألق.لذلك ، فإن اكتشاف الحمض النووي هو في الواقع لتحديد ما إذا كان هناك حمض نووي فيروسي في العينة عن طريق الكشف عن تراكم إشارات الفلورسنت.

2. ما هي أنواع عينات اختبار الحمض النووي؟

بشكل عام ، مسحات الأنف ، مسحات الحلق ، مسحات البلعوم الأنفي ، البلغم ، سائل غسيل الشعب الهوائية ، سائل غسيل السنخ ، إلخ.

3. الكشف من خمس خطوات يتطلب إجراء الكشف عن فيروس كورونا الجديد خمس خطوات: أخذ العينات ، والاحتفاظ بالعينة ، والتخزين ، واستخراج الحمض النووي ، واختبار الكمبيوتر.هذا يتطلب تجارب علمية صارمة لإكمالها.

1. امسح الجدار الخلفي لمسحة البلعوم واللوزتين البلعوميتين 5-10 مرات لكل منهما بمسحة بلعومية ، واستمر في تدوير المسحة ؛

2. يطلب من الطاقم الطبي الاحتفاظ بالعينة ، ويتم غمر رأس المسحة في محلول حفظ الخلية ، ويتم كسر الذيل.شد غطاء الأنبوب على الفور ؛

3. احفظ ، ضع أنبوب العينة في كيس مغلق وأرسله للفحص في الوقت المناسب ، وتتطلب عملية الفحص بيئة نقل صارمة ، مخزنة في 2-8 درجات مئوية.

4. تشغيل استخراج الحمض النووي ، واستخراج الحمض النووي من عينة الفيروس المعطل للكشف اللاحق ، واستخدام المعدات الآلية ، مثل مستخرج الحمض النووي.

5. الكشف عن الحمض النووي PCR الفلوري ، أي ، الكشف عن الجهاز ، يستغرق 70-80 دقيقة لخضوع المستخلص لتفاعل تضخيم PCR الفلوري.

4. ما هي المشاكل مع الكشف عن الحمض النووي؟

السلبي الكاذب ، بسبب أخذ العينات بشكل غير صحيح ، والتخزين غير السليم للعينات ، واستخدام أنواع مختلفة من العينات ، واستخدام الكواشف من مختلف الصانعين قد يتسبب في أن تكون نتائج اختبار الحمض النووي "سلبية زائفة" وفقدان التشخيص

المتطلبات العالية لمعدات أو منصات الكشف ، وأجهزة RT-PCR عالية الحساسية باهظة الثمن وتتطلب نظافة عالية في المختبر ومشغلين ؛

يستغرق اختبار الحمض النووي وقتًا طويلاً ، وعادةً ما يستغرق 4-6 ساعات لإكمال اختبار RT-PCR.ومع ذلك ، بالنظر إلى نقل العينات ، في حالة وجود تراكم كبير للعينات ، يمكن عادةً الإبلاغ عن النتائج في أقرب وقت ممكن خلال 24 ساعة.لذلك ، عندما يكون اختبار الحمض النووي سالبًا ، يمكن أن تعوض إضافة اكتشاف الأجسام المضادة IgM و IgG عن أوجه القصور التي من المحتمل أن يتسبب اختبار الحمض النووي في فقدان التشخيص.